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紫外交联仪经常应用的实验

更新时间:2024-02-27      点击次数:866
  威尼德紫外交联仪:在Northern blotting、Southern blotting、EMSA等尼龙膜、硝酸纤维素膜的交联、Sterilization(灭菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的应用。
 
  紫外交联技术是一种常用于材料科学和化学领域的重要技术手段。随着材料研究的不断深入,紫外交联仪逐渐成为了广泛应用的分析设备。
 
  紫外交联仪利用紫外光对材料进行照射,通过能量的输入和材料分子之间的相互作用,实现材料的共价键形成或断裂。当紫外光照射在材料上时,光能激发材料内部的电子,使其跃迁到较高的能级。这些激发态的电子会与周围的分子发生相互作用,进而导致化学键的形成或断裂,从而实现材料的交联或解交联。
 
  紫外交联仪在材料科学中有广泛的应用。首先,在涂料和粘合剂领域,可用于评估和控制材料的交联程度,从而影响材料的硬度、耐久性和附着力。其次,在聚合物材料领域,可用于研究聚合反应的动力学过程,确定较佳交联条件和优化聚合物的性能。此外,还可应用于纺织品、电子器件、医疗器械和涂层等领域。
 
  紫外交联仪作为一种分析设备,在材料科学中具有多个优势。首先,操作简单、速度快,可实时监测交联反应的进行,提高研究效率。其次,具有较高的灵敏性和准确性,可以对微小的交联变化进行检测和测量。另外,不需要添加化学试剂,对样品无损伤,适用于各种材料的表面和体积分析。
 
  紫外交联仪作为一种重要的分析设备,在材料科学中发挥了重要作用。它通过紫外光的照射实现材料的交联或解交联,应用广泛。它具有操作简单、速度快、灵敏性高等优势,能够实时监测交联过程,并对材料的性能进行评估和控制。随着技术的不断发展,它在材料科学中的应用前景将更加广阔。
 
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        1.Membrane Blotting(膜印迹)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交联仪可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交联,当使用254 nm波长、能量为120.0mJ/cm2交联时,尼龙模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之间形成共价键稳定。
 
  (1)将一张或两张用转移缓冲液(如10×SSC)轻轻润湿的吸水纸放在VL系列紫外交联仪的样品腔。将尼龙膜放在吸水纸上,使附着核酸的一面朝上,使紫外线灯管能够直接照射核酸。
 
  (2)关闭VL系列紫外交联仪的门。
 
  (3)按下Run/Pause(运行/暂停)按键启动,当紫外线灯管亮时,显示屏将立即开始从输入值开始累计。如果在曝光期间的任何点打开门,照射将停止,并显示已曝光值。(关上门按Run/Pause按键继续照射。)
 
  (4)辐照完成后,蜂鸣器将鸣响约3–4秒。自动交联大约需要25–50秒。
 
  (5)取下尼龙膜并关上门,交联完成。每次使用后,清洁紫外线交仪样品腔,以清除残留的盐。
 
  2.DNA Nicking(DNA缺失)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司紫外线交联剂也可用于切割溴化乙锭染色的琼脂糖凝胶中的DNA,代替HCl洗涤液,琼脂糖凝胶中比较大的DNA(>20kb)的转模效率很低,因此DNA在转移到尼龙膜之前需要进行前处理。DNA可通过HCl或紫外线照射进行切割。HCl脱嘌呤反应较难控制,且对温度极为敏感。所以在转移前,在短波长紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。
 
  3.Sterilization(灭菌)
 
  紫外线杀菌就是通过紫外线照射,破坏及改变微生物的DNA(脱氧核糖核酸)结构,使细菌当即死亡或不能繁殖,达到杀菌的目的。真正具有杀菌作用的是UVC紫外线,因为C波段紫外线很容易被生物体的DNA吸收,尤其是254nm波长左右紫外线最佳。紫外线杀菌属于纯物理消毒方法,具有简单便捷、光谱高效、无二次污染。因此在短波长紫外光(254 nm)中灭菌95sec。
 
  4.RecA Screening(RecA筛选)
 
  紫外线交联剂也可用于筛选RecA突变体,在短波长紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突变体阻止了紫外线诱导损伤的修复,阻止了紫外照射过的过的recA细胞的生长。