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11-22
原位杂交仪是一种用于分子生物学实验的仪器,它允许研究者在细胞或组织切片上直接检测特定的DNA或RNA序列。1.基本原理:原位杂交技术基于核酸分子间的互补配对原则,即两条核苷酸单链片段在适宜条件下通过氢键结合,形成双链结构。2.探针类型:原位杂交仪使用带有标记的DNA或RNA片段作为探针,这些探针可以是放射性同位素标记或非放射性物质(如荧光素生物素)标记。3.实验步骤:原位杂交实验包括探针变性、切片处理、杂交反应和信号检测等步骤。其中,变性是使双链DNA解旋成单链的过程,这是杂...
11-19
一、引言电转化仪,也称为电穿孔仪或电转染仪,是一种广泛应用于生物技术领域的实验仪器。它主要用于将外源DNA、RNA或其他分子导入到细胞中,从而实现基因编辑、蛋白质表达等目的。本文将详细介绍电转化仪的原理、应用以及在使用过程中需要注意的事项。二、电转化仪的原理它的工作原理基于电场对细胞膜的影响。当施加一个短暂的高强度电场时,细胞膜上的磷脂双分子层会发生瞬时的紊乱,形成一个暂时性的孔洞。这些孔洞允许外源DNA、RNA或其他分子进入细胞内部。一旦电场消失,细胞膜会迅速恢复其正常结构...
11-14
当核酸分子杂交箱出现故障时,应进行初步检查和确认,然后针对具体故障进行分析和排查。如果无法解决问题,建议联系供应商或制造商的技术支持部门进行专业维修。同时,加强预防措施和日常维护也是减少设备故障的有效手段。一、初步检查与确认观察故障现象:仔细观察并记录故障现象,如无法启动、温度异常、杂交效率低等。检查电源:确认电源插座是否正常供电,电源线是否插紧。检查电源开关是否处于开启状态。二、核酸分子杂交箱的具体故障分析与排查温控系统故障:现象:环境温度超出预设范围。分析:可能是温控系统...
11-1
电穿孔仪工作时,会在含有细胞的介质中施加一个短时的、高强度的电场。这个电场通常由电极产生,电极间的距离和电场强度都是可以调节的参数。在电场作用下,细胞膜上的磷脂分子头部朝向电场的负极,而疏水的尾部则朝向正极,这种重新排列导致膜的稳定性下降,从而形成孔洞。这些孔洞是动态的,它们在电场作用后不久就会自行封闭。孔洞的存在时间通常很短,从几毫秒到几秒不等,具体时间取决于电场的强度、持续时间以及细胞类型。电穿孔仪有多种类型,包括批量电穿孔和单细胞电穿孔,开放式电穿孔器和封闭式电穿孔器,...
10-26
分子杂交仪(molecularhybridizationinstrument)是用于分子生物学研究的仪器,主要用于DNA或RNA的杂交实验。它的工作原理可以简要概括如下:1.样品制备:需要准备待测的DNA或RNA样品。样品可以是提取自细胞或组织的总RNA或总DNA,也可以是经过特定处理的特定片段的DNA或RNA。2.探针标记:接下来,需要准备一种能够与待测样品中目标序列互补配对的DNA或RNA探针。通常,这些探针会经过标记,例如使用荧光染料或放射性同位素进行标记,以便后续检测...
10-18
基因导入仪基于不同的物理或化学原理,实现外源基因向细胞内的转移。常见的物理方法包括电穿孔法、显微注射法、激光微照射等,这些方法通过施加外力(如电场、机械压力或激光)来破坏细胞膜的完整性,使外源基因能够进入细胞内部。化学方法则主要利用某些化学物质(如脂质体、聚乙二醇等)与DNA结合,形成复合物后通过细胞膜的内吞作用进入细胞。基因导入仪的类型:电穿孔:利用短暂的高压电场在细胞膜上形成微小孔洞,允许DNA分子通过。这种方法操作简便,效率高,适用于多种细胞类型。显微注射:通过显微操作...
10-12
细胞电转化仪利用电穿孔技术,将外源性DNA或其他分子物质导入到细胞或细菌细胞内。其原理是在高压电场的作用下,细胞膜会发生短暂的孔洞(电穿孔现象),从而使外源性DNA能够穿透细胞壁和细胞膜,进入细胞内部,甚至到达细胞核,实现基因的转移或表达。细胞电转化仪的工作步骤:将细胞与外源基因物质混合在适当的缓冲液中。通过电极对混合液施加电场,使细胞膜上形成孔隙。外源基因物质在电场的作用下进入细胞,并被输送到细胞核内(对于细胞核电转化仪而言)。转染后的细胞在适宜的条件下进行培养,使导入的基...
9-27
在现代生物学研究中,分子杂交技术作为一种重要的实验手段,广泛应用于基因表达分析、疾病诊断、遗传学研究等领域。分子杂交仪则是实现这一技术的关键设备之一。它通过模拟自然条件下的杂交过程,使DNA或RNA序列能够在特定条件下高效地结合,从而为科学研究提供了强大的支持。本文将详细介绍分子杂交仪的工作原理、应用范围及其在生物医学领域的重要作用。工作原理分子杂交是指两个互补的核酸链(DNA与DNA、DNA与RNA或RNA与RNA)在一定条件下通过碱基配对原则形成稳定双链的过程。分子杂交仪...