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摘要通过基因转染技术将肝细胞生长因子(HGF)导入关节软骨细胞,探讨其对细胞增殖、基质合成及分化潜能的影响。实验采用威尼德电穿孔仪实现质粒高效转染,结合免疫荧光、qRT-PCR及Westernblot分析HGF表达及功能。结果显示,HGF显著促进软骨细胞增殖并增强胶原与蛋白聚糖合成,同时抑制细胞肥大化。研究表明,HGF基因干预可优化软骨细胞生物学特性,为关节退行性病变的再生治疗提供新策略。引言关节软骨损伤及退行性病变是骨科领域的治疗难点,由于软骨组织自我修复能力有限,传统疗法...
4-14
摘要研究通过电穿孔法将携带周期型马来丝虫基因的重组质粒导入哺乳动物细胞,利用某试剂抗生素筛选获得稳定转染单克隆株。经威尼德分子杂交仪检测基因整合,qPCR及Westernblot验证表达水平,结合威尼德紫外交联仪分析蛋白修饰。结果显示,目标基因在细胞中呈现稳定周期性表达,昼夜节律振幅达3.8倍,为丝虫生物钟机制研究提供了可重复的体外模型。引言马来丝虫(Brugiamalayi)作为淋巴丝虫病的主要病原体,其生命周期受宿主生物钟调控的现象已引起广泛关注。近年研究发现,丝虫体内存...
4-14
摘要TRAIL基因转染至神经干细胞,评估其对肿瘤细胞的靶向杀伤效应。利用威尼德电穿孔仪完成基因转染,采用某试剂进行细胞培养及功能验证。体外实验显示,转染后神经干细胞高表达TRAIL蛋白,显著诱导胶质瘤细胞凋亡;体内实验证实其可抑制裸鼠移植瘤生长。结果表明,神经干细胞携带TRAIL基因具备潜在抗肿瘤应用价值。引言肿瘤的靶向治疗是当前研究热点,传统化疗及放疗因缺乏特异性易损伤正常组织。TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)可选择性诱导肿瘤细胞凋亡,但其半衰期短、全身毒性限制临...
4-14
摘要研究通过构建bFGF基因表达载体,采用威尼德电穿孔仪对骨髓基质细胞进行基因转染,探讨其表达效率及生物学功能。实验优化了转染条件,并通过Westernblot和免疫荧光技术检测蛋白表达水平。结果显示,转染后细胞中bFGF蛋白显著上调,且细胞增殖活性增强。该研究为基于基因修饰的骨再生治疗提供了实验依据。引言碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是调控细胞增殖、分化和组织修复的关键因子,其在骨代谢中的作用备受关注。骨髓基质细胞(BMSCs)具有多向分化潜能,是骨组织工程的重要种子细...
4-14
摘要酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组质粒,利用威尼德电穿孔仪将其转染至神经干细胞(NSCs),探讨TH基因在NSCs中的表达效率及对多巴胺能分化的影响。实验结果显示,转染后细胞TH蛋白表达显著升高,且分化后多巴胺能神经元标志物阳性率增加。结果表明,TH基因转染可有效促进NSCs向多巴胺能方向分化,为神经退行性疾病的细胞治疗提供实验依据。引言神经干细胞(NSCs)因其自我更新和多向分化潜能,成为再生医学领域的研究热点。酪氨酸羟化酶(TH)作为多巴胺合成的限速酶,其表达水平直接影响...
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选择适合植物原生质体电穿孔实验的电穿孔仪,需要考虑以下几个方面:1.电穿孔仪的类型:双波全能型电穿孔仪:威尼德的双波全能型电穿孔仪等,结合了指数波和方波的优点,具有更广泛的适用性和灵活性,可根据不同植物原生质体的特性和实验需求,选择合适的波型和参数,是进行植物原生质体电穿孔实验的理想选择之一。2.参数设置范围:电压调节范围:植物原生质体电穿孔实验通常需要较高的电压,一般在1003000V之间。脉冲持续时间:脉冲持续时间一般在1μs10ms之间。较短的脉冲适用于对电场敏感的植物...
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摘要分子克隆技术构建了RAB5A基因的真核表达载体,并验证其功能。利用威尼德电穿孔仪将重组质粒转染至HEK293T细胞,通过荧光显微观察和Westernblot检测RAB5A蛋白表达。结果表明,载体成功定向克隆RAB5A基因,并在真核细胞中高效表达,为后续研究RAB5A的细胞功能奠定基础。引言RAB5A是调控早期内吞体运输的关键小GTP酶,其功能异常与肿瘤转移、神经退行性疾病密切相关。目前,针对RAB5A的研究多依赖瞬时表达系统,但稳定表达载体的缺乏限制了其功能分析的深度。定...
3-26
摘要内蒙株细粒棘球蚴抗原基因Eg95为靶点,通过分子克隆技术构建真核表达载体,利用威尼德电穿孔仪转染HEK293T细胞,验证抗原蛋白表达。动物实验表明,核酸疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体及Th1型免疫应答,为包虫病防控提供新策略。引言细粒棘球蚴病(囊型包虫病)是人畜共患寄生虫病,流行于畜牧区,严重威胁公共卫生安全。传统疫苗研发多依赖重组蛋白或灭活病原体,存在成本高、免疫原性不足等局限。核酸疫苗通过递送抗原基因至宿主细胞,直接表达靶蛋白,可激活细胞与体液免疫双重应答,具有高效、安...