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8-19
在CRISPR基因编辑实验中,设计好sgRNA、准备好Cas蛋白或表达载体,并不意味着实验就已经成功了一半。对于很多科研人员来说,真正让人头疼的往往是后面的导入环节:CRISPR电转效率不稳定、细胞死亡率偏高、同样的参数换一批细胞结果就发生明显变化。尤其是在原代细胞、干细胞、部分免疫细胞以及其他难转染细胞中,CRISPR体系能否有效进入细胞,往往直接影响后续编辑效率和实验重复性。那么,CRISPR电转到底应该从哪些环节优化?一、不要只盯着电压,细胞状态同样重要很多人在CRIS...
8-18
实验室采购分子杂交仪时,最常见的问题通常是:“这台设备多少钱?”价格当然重要。但真正使用过实验设备的人都知道,仪器采购最怕的并不是价格稍高,而是设备买回来以后发现:实验做不了;样品放不下;功能不匹配;后续增加项目又需要重新采购设备。因此,如果正在选择分子杂交仪,与其第一步就比较报价,不如先把几个关键问题弄清楚。第一个问题:你主要做什么实验?这是所有设备选型的基础。不同实验室对分子杂交仪的使用需求可能不同。有的主要进行核酸分子杂交;有的用于基因检测相关实验;有的还需要进行酶联反...
8-18
很多实验室都有一个共同现象:随着实验项目越来越多,设备也越来越多。恒温设备一台、摇床一台、杂交相关设备一台,碰到新的实验需求,还要继续增加仪器。看起来实验条件越来越符合用户使用习惯,但真正使用一段时间以后,新的问题又出现了:设备占用空间越来越大;不同实验之间需要频繁转移样品;操作步骤增加;设备利用率却不一定高。对于核酸分子杂交、酶联反应孵育、膜处理等实验来说,如果能够通过一台设备覆盖更多应用场景,实验室整体效率往往会明显提高。V-leader威尼德VH系列分子杂交仪,就是围绕...
8-18
准备采购分子杂交仪时,很多客户最先问的是:“VH-1000和VH-4000,我应该选哪一个?”事实上,实验室设备选型很少存在单纯的“哪个型号更好”。真正应该问的是:哪种配置更适合自己的实验。尤其是分子杂交仪这种需要长期使用的实验设备,如果只比较采购价格,而没有考虑实验类型、使用频率以及后续拓展需求,很容易出现一种情况——设备买回去能用,但并不好用,或者过一段时间又需要增加其他仪器。因此,在了解V-leader威尼德VH系列分子杂交仪时,可以先从实际实验需求出发。先看你的核心实...
8-18
不少实验室做核酸分子杂交时,设备配置都是一步一步增加起来的。需要恒温,就用水浴设备;需要摇动,就配摇床;需要杂交,就准备杂交袋;碰到不同规格的实验,又继续增加新的设备。刚开始可能觉得这样成本不高,但实验项目越来越多以后,问题就慢慢出现了:设备越来越占地方,操作流程越来越复杂,不同设备之间还要反复转移样品。更重要的是,对于分子杂交这类对温度稳定性和反应均匀性要求较高的实验来说,传统设备未必能够很好地解决所有问题。这也是专用分子杂交仪逐渐受到实验室关注的原因。第一件事:把“温度问...
8-18
做过核酸分子杂交、基因检测或者酶联反应实验的人,应该都遇到过类似情况:明明实验步骤没有明显问题,同样的样品、同样的试剂,不同批次做出来的结果却有差异;杂交袋封装起来麻烦,一旦出现漏液,不仅样品浪费,还可能带来污染风险;使用传统水浴摇床时,又担心温度不均、升温速度慢,影响实验重复性。很多时候,我们会反复检查试剂、样品和操作流程,却容易忽略一个重要因素——设备能不能给实验提供持续、稳定、均匀的反应环境。这也是越来越多实验室开始使用专用分子杂交仪的重要原因。温度稳不稳定,直接影响实...
8-17
做NK细胞电转,最怕的不是实验失败一次。真正麻烦的是“不知道为什么失败”。有时候是转染效率低。有时候效率不错,但细胞死得多。还有时候效率和活率看起来都没有明显问题,等真正做杀伤实验、脱颗粒实验或者细胞因子检测时,却发现功能状态不对。这三种情况表面上都可以叫“NK细胞电转效果不好”,但背后的排查方向不同。因此,与其不停更换程序,更重要的是先判断:你的问题到底属于哪一种?情况一:细胞活得很好,但是转不进去如果电转后细胞活率和恢复都没有明显异常,但目的分子递送效率很低,首先应该考虑...
8-17
如果实验室准备采购一套NK细胞电转设备,很多人第一件事就是比较产品参数:哪个宣传的转染效率更高?哪个电压范围更大?哪个程序更多?但如果你的应用真正涉及原代NK、CAR-NK或CRISPR-NK,只比较一个“最高转染效率”,其实远远不够。因为买设备不是为了完成一次漂亮的GFP实验。真正的目标,是让它进入你的研究流程,并且未来还能继续使用。因此,从客户角度出发,选NK细胞电转平台之前,第一个应该问的问题是:未来我要处理多少细胞?如果目前只是做早期条件筛选,每组几十万到一两百万个细...