摘要起搏基因质粒的高效构建方法及其在心肌细胞中的体外转染机制。通过分子克隆技术构建携带HCN4基因的重组质粒，并利用电穿孔法优化转染条件。实验结果表明，优化后的转染方案显著提升了心肌细胞的基因表达效率，且未影响细胞活性。该研究为心脏起搏机制的体外模拟及基因治疗提供了理论依据与技术参考。引言心脏起搏功能依赖于窦房结细胞的自主节律性，而超极化激活环核苷酸门控通道（HCN4）基因是调控这一过程的核心分子。近年来，基因编辑与体外转染技术的发展为心脏疾病模型构建及治疗策略开发提供了新思...

摘要近年来，树突状细胞（DC）肿瘤疫苗在免疫治疗领域展现出重要潜力。本研究聚焦RNA修饰技术对DC疫苗功能的影响，通过优化RNA转染效率及稳定性，探索其激活抗肿瘤免疫的分子机制。实验表明，化学修饰的RNA可显著提升DC抗原呈递能力，并通过动物模型验证了疫苗的抑瘤效果。本研究为RNA修饰技术在肿瘤疫苗开发中的应用提供了理论依据。引言树突状细胞作为抗原呈递的核心细胞，其肿瘤疫苗的研发是肿瘤免疫治疗的重要方向。传统DC疫苗依赖外源性抗原负载，存在递送效率低、免疫原性不足等问题。RN...

摘要低强度瞬态电磁场（LT-EMF）模型，探究其对细胞膜通透性的调控机制。实验采用威尼德电穿孔仪施加特定参数电磁脉冲，结合荧光标记法分析细胞膜完整性及分子跨膜效率。结果显示，LT-EMF可在不显著影响细胞活性的前提下诱导可逆性膜穿孔，为基因递送及药物传输提供新型技术路径。引言细胞膜穿孔技术是基因编辑、药物递送及分子生物学研究的核心工具。传统电穿孔依赖高强度电场，易导致细胞不可逆损伤，限制其临床应用。近年来，低强度瞬态电磁场（LT-EMF）因其非热效应和可控性受到关注，但其诱导...

摘要猪瘟病毒抗性基因表达载体，利用电穿孔技术将其转染至仔猪皮肤成纤维细胞中，评估转染效率及抗病毒效应。实验结果显示，转染后细胞中抗性基因mRNA及蛋白表达显著上调，且对猪瘟病毒感染的抵抗力显著增强。研究为抗病基因编辑动物模型开发提供了技术参考，并揭示了抗性基因在细胞内的功能机制。引言猪瘟（ClassicalSwineFever,CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的高传染性动物疫病，对全球养猪业造成严重经济损失。传统疫苗防控存在局限性，基因编辑技术为培育抗病动物提供了新思路。...

摘要基因转染人羊膜细胞（hAMCs）对颅脑创伤（TBI）大鼠海马修复的调控机制。通过构建大鼠TBI模型，移植过表达神经营养因子的基因修饰hAMCs，结合行为学、分子生物学及组织学分析，发现干预组大鼠认知功能显著改善，海马神经元再生增强，凋亡通路受抑制。实验表明，基因修饰hAMCs可通过旁分泌与细胞直接整合协同促进神经修复，为TBI治疗提供新策略。引言颅脑创伤（TBI）是导致神经功能障碍的主要病因之一，其病理机制涉及神经元凋亡、炎症反应及再生障碍。海马区作为记忆与认知功能的核心...

摘要多药耐药基因（MDR1）转染至细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK），探索其耐药性增强机制及临床应用潜力。实验采用电穿孔技术实现基因转染，并通过体外耐药性评估和动物模型验证功能。结果显示，转染后CIK细胞对化疗药物的耐受性显著提升，同时维持抗肿瘤活性。研究为优化肿瘤联合治疗方案提供了实验依据。引言肿瘤化疗的疗效常因多药耐药性（MDR）而受限，MDR1基因编码的P-糖蛋白可通过外排药物降低细胞内药物浓度。细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）作为一种过继性免疫治疗手段，在实体瘤治疗中展...

摘要GAD65基因在神经递质合成中具有重要作用，但其对神经干细胞分化的调控机制尚不明确。GAD65过表达/敲低的神经干细胞模型，结合体外分化诱导体系，系统分析了GAD65对细胞增殖、分化的影响。实验采用威尼德电穿孔仪进行基因编辑，结合免疫荧光染色及qPCR技术检测分化标志物表达。结果表明，GAD65通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响神经干细胞向GABA能神经元分化，为神经退行性疾病治疗提供了新思路。引言γ-氨基丁酸（GABA）是中枢神经系统中重要的抑制性神经递质，...

摘要磁性壳聚糖纳米载体构建了一种高效、低毒的eNOS基因递送系统，用于血管平滑肌细胞的靶向转染。通过优化载体制备工艺，结合磁靶向技术，显著提升了基因转染效率并降低细胞毒性。实验结果表明，该载体可实现eNOS基因的稳定表达，且对细胞活性无显著影响，为心血管疾病的基因治疗提供了新策略。引言血管平滑肌细胞（VSMCs）的异常增殖与迁移是动脉粥样硬化、支架内再狭窄等心血管疾病的核心病理机制。内皮型一氧化氮合酶（eNOS）可通过催化一氧化氮（NO）生成，抑制VSMCs过度增殖并改善血管...