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4-22
摘要恶性疟原虫基因稳定转染技术是研究其致病机制及抗疟药物开发的重要工具。研究通过优化电穿孔参数、筛选标记基因及改进体外培养条件,实现了恶性疟原虫红细胞内期的高效转染。实验采用威尼德电穿孔仪与分子杂交仪,结合某试剂完成质粒递送与基因整合验证。结果显示,转染效率提升至15%,阳性克隆筛选周期缩短至3周,为后续功能基因组学研究提供了可靠技术支撑。引言恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)是导致人类疟疾的主要病原体,其复杂的生命周期和基因调控机制使得基因编辑技术在其研...
4-21
摘要研究通过构建p16基因过表达载体并转染至肾癌786-O细胞,探讨p16对细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。实验采用威尼德电穿孔仪完成转染,通过CCK-8、流式细胞术及Transwell模型分析生物学行为变化。结果显示,p16过表达显著抑制肾癌细胞增殖与迁移,并诱导细胞周期阻滞。本研究为肾癌靶向治疗提供了潜在分子机制依据。引言肾细胞癌是泌尿系统常见恶性肿瘤,具有高转移性与化疗耐药特征。p16基因作为细胞周期负调控因子,其失活与多种肿瘤进展相关。已有研究表明,p16通过抑制CDK4...
4-21
摘要研究探讨神经干细胞(NSCs)经TRAIL基因转染后对胶质瘤的抑制作用。通过威尼德电穿孔仪将TRAIL基因导入NSCs,采用体外共培养及小鼠原位移植瘤模型评估其抑瘤效果。结果显示,转染组肿瘤细胞凋亡率显著升高(P引言胶质瘤是中枢神经系统常见恶性肿瘤,传统治疗手段因血脑屏障限制及肿瘤异质性难以。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可通过激活死亡受体选择性诱导肿瘤细胞凋亡,但其半衰期短且全身给药易被清除。神经干细胞(NSCs)具有肿瘤趋向性,可作为基因递送载体靶向肿瘤微...
4-21
摘要在评估多药耐药基因(MDR1)修饰的造血干细胞(HSCs)移植至小鼠体内的安全性。通过慢病毒载体介导的基因转导技术对HSCs进行修饰,结合威尼德电穿孔仪优化转染效率,随后将细胞移植至辐照预处理小鼠中。结果显示,移植后小鼠外周血细胞MDR1表达稳定,未观察到显著毒性或免疫排斥反应,血液学指标及脏器病理学分析均证实安全性良好。本研究为基因修饰干细胞临床应用提供了实验依据。引言多药耐药(MDR)现象是肿瘤化疗失败的主要原因之一,而通过基因工程手段赋予造血干细胞耐药特性,有望保护...
4-21
摘要Twist基因过表达对胃癌细胞VEGF表达的影响。通过威尼德电穿孔仪将Twist表达质粒转染至人胃癌细胞系,利用qPCR、Westernblot及免疫荧光检测VEGF转录及蛋白水平变化。结果显示,Twist显著上调VEGF表达并促进细胞侵袭迁移,提示其可能通过调控血管生成通路影响胃癌进展,为靶向治疗提供潜在分子依据。引言胃癌是全球高发恶性肿瘤之一,其侵袭转移与血管生成密切相关。血管内皮生长因子(VEGF)是调控肿瘤血管生成的核心因子,其异常表达与胃癌预后不良显著相关。Tw...
4-21
摘要Nanog基因转染对表皮干细胞增殖、分化及自我更新能力的影响。通过构建Nanog过表达质粒,利用威尼德电穿孔仪进行转染,结合qPCR、Westernblot及功能实验分析基因表达与细胞行为变化。结果显示,Nanog显著增强表皮干细胞增殖活性并延缓分化进程,同时上调多能性相关基因。研究为表皮干细胞再生医学应用提供了理论支持。引言表皮干细胞是皮肤组织修复与再生的核心细胞群,其自我更新与分化平衡受多种转录因子调控。Nanog作为核心多能性因子,在胚胎干细胞中维持未分化状态,但其...
4-19
摘要巴斯德毕赤酵母表达系统高效分泌表达胱抑素C,通过优化培养条件及诱导参数提高蛋白产量。采用某品牌纯化系统获得高纯度胱抑素C,并评估其免疫原性。结果表明,重组胱抑素C具有良好抗原性,为后续抗体开发及诊断应用奠定基础。引言胱抑素C是一种低分子量蛋白质,广泛存在于各种体液中,作为肾小球滤过率的重要标志物,在临床诊断中具有重要价值。传统获取胱抑素C的方法多从人尿中提取,但产量低且纯度难以保证。近年来,重组DNA技术的发展为大规模生产重组胱抑素C提供了新思路。巴斯德毕赤酵母(Pich...
4-19
摘要利用毕赤酵母表达系统高效制备重组海葵毒素蛋白。通过密码子优化合成毒素基因,构建pPICZαA重组质粒并电转化至某品牌毕赤酵母GS115中。采用甲醇诱导表达,经某品牌Ni柱纯化获得高纯度重组蛋白。SDS-PAGE和Westernblot验证显示目的蛋白分子量约为25kDa,纯度达95%以上。该研究为海葵毒素的大规模制备及功能研究奠定了基础。引言海葵毒素是一类具有重要生物活性的多肽物质,在神经生物学研究和药物开发领域具有广阔应用前景。传统从海葵中直接提取毒素的方法存在产量低、...