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摘要:本研究旨在构建重组真核表达载体pIRESneo2/mIL-2,并在哺乳类工程细胞C2C12中实现持续稳定表达小鼠白介素2(mIL-2)。通过脂质体转染法导入重组载体,经Westernblots验证成功表达mIL-2。本研究为mIL-2的进一步研究和应用提供了重要基础,具有重要的学术和应用价值。引言:白介素2(IL-2)是一种重要的细胞因子,属于白介素家族,对免疫系统具有显著的调节作用。IL-2能够刺激和增强T细胞的增殖和活化,促进免疫细胞亚群的分化和功能调节,因此在免疫...
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摘要:本研究旨在通过基因打靶技术,构建牛朊蛋白基因prnp的敲除载体,并转染牛胎儿成纤维细胞,实现prnp基因的高效敲除。利用正负筛选策略富集中靶细胞,最终获得了9个阳性细胞克隆。本研究为生产抗疯牛病的转基因牛提供了理论基础和技术支持。引言:朊蛋白(Prionprotein)是动物传染性海绵状脑病的致病蛋白,由prnp基因编码的一种糖蛋白。在牛中,这种病症被称为疯牛病(BSE),是一种严重危害人类健康和世界经济发展的传染性疾病。疯牛病的病原体是PrPsc,一种内源性膜锚定蛋白...
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摘要:本文探讨了聚凝胺(Polybrene)在提升慢病毒转染树突状细胞效率中的作用。通过详细的实验设计和实施,发现聚凝胺能显著增强病毒颗粒与树突状细胞的结合,从而提高转染效率。本研究为基因功能研究和基因治疗提供了新的策略,具有广阔的应用前景。引言:基因转染技术在生物医学研究中占据重要地位,尤其在基因功能研究和基因治疗领域。慢病毒载体因其高效、稳定的特点而被广泛应用于细胞转染。然而,树突状细胞(DendriticCells,DCs)作为重要的免疫细胞,其转染效率一直较低,限制了...
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引言内耳疾病,如感音神经性耳聋和梅尼埃病等,严重影响患者的生活质量。基因治疗作为一种新兴的治疗手段,在内耳疾病的治疗中展现出巨大潜力。然而,内耳结构的复杂性和对损伤的高度敏感性,使得基因递送成为一大挑战。慢病毒载体因其高效、持久的基因表达能力,成为内耳基因治疗研究的工具。小鼠耳蜗鼓室内注射是常用的内耳基因递送方法之一,但转染效率往往受到多种因素的影响。因此,优化小鼠耳蜗鼓室内慢病毒转染技术,提高转染效率和安全性,对于推动内耳基因治疗的发展具有重要意义。构建慢病毒转染内耳疾病的...
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引言:SARS(严重急性呼吸综合征)冠状病毒是一种高传染性的病原体,自2002年底爆发以来,对全球公共卫生构成了严重威胁。SARS-CoV的S蛋白不仅是病毒的主要结构蛋白,还在病毒与宿主细胞表面受体结合及介导膜融合进入细胞的过程中起关键性作用。因此,S蛋白成为SARS疫苗研究的主要靶点。裂殖酵母作为一种非常有前景的外源基因表达系统,表达的外源蛋白更接近其天然特性,是分子生物学研究中的重要工具。本研究旨在构建SARS-CoVS蛋白在裂殖酵母中的表达体系,为进一步研究新一代SAR...
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引言外源基因导入哺乳动物细胞是基因功能研究、基因治疗及细胞工程等领域的关键技术。高效、安全的基因转移方法对于实现外源基因在细胞内的稳定表达至关重要。传统方法如脂质体介导转染、病毒载体转导等虽各有优势,但存在细胞毒性大、操作复杂或安全性隐患等问题。电穿孔法作为一种物理转染技术,通过短暂施加高压电场使细胞膜形成微小孔洞,允许外源DNA进入细胞,具有操作简便、适用范围广及可大规模应用等优点。然而,电穿孔过程对细胞损伤较大,转化效率与细胞存活率往往难以平衡,限制了其广泛应用。构建高效...
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摘要:本文详细阐述了大豆矮杆导入系的外源片段剖析及基因定位研究,通过绘制图示基因型方法分析了含有矮杆基因S的片段导入系,共检测到100个导入片段,确定了多个与矮杆基因密切相关的位点。本研究为进一步研究大豆矮杆基因提供了重要基础,对大豆育种具有重要意义。引言:大豆(Glycinemax)作为重要的粮油兼用作物,在全球范围内广泛种植。大豆种子富含蛋白质和植物油,对人类饮食和健康具有重要作用。然而,传统大豆品种生长周期长、植株高大,给管理和收割带来不便。因此,培育矮杆大豆品种成为大...
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摘要本研究旨在探索电穿孔介导睫状神经营养因子(CNTF)基因转染在延缓失神经骨骼肌方面的疗效。通过构建CNTF基因转化体系,采用某品牌电穿孔仪对SD大鼠进行基因转染,观察其对骨骼肌的抑制作用。实验结果表明,电穿孔介导CNTF基因转染可显著延缓失神经骨骼肌进程,为神经肌肉疾病的治疗提供新的策略。引言神经营养因子(NTFs)作为一类具有促进和维持神经细胞生长、存活和分化的特异性蛋白质,为神经修复治疗带来了新的希望。睫状神经营养因子(CNTF)是NTFs中的重要成员,具有广泛的生理...