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摘要cMet基因的siRNA慢病毒载体,并通过稳定转染筛选获得高效抑制cMet表达的细胞模型。实验采用分子克隆技术设计特异性siRNA序列,利用威尼德电穿孔仪完成病毒包装,经荧光标记筛选及Westernblot验证,成功获得稳定转染细胞系。结果显示,cMet蛋白表达显著降低,为后续功能研究提供了可靠工具。引言cMet基因编码的肝细胞生长因子受体(HGFR)在肿瘤侵袭、转移及耐药性中发挥关键作用。其异常激活与多种癌症不良预后密切相关,因此靶向cMet的基因沉默技术成为研究热点。...
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摘要:分子克隆技术构建人CD160基因过表达载体,利用威尼德电穿孔仪转染HEK293T及Jurkat细胞系,筛选获得稳定转染细胞株。通过流式细胞术、CCK-8增殖实验及Transwell迁移模型系统分析CD160对细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。结果显示CD160过表达显著抑制T淋巴细胞活化并促进肿瘤细胞迁移,Westernblot证实其通过调控PI3K/AKT信号通路发挥作用,为免疫调控机制研究提供新模型。引言:CD160作为免疫球蛋白超家族成员,在T/B淋巴细胞表面特异性...
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摘要蝎毒多肽对慢性粒细胞白血病(CML)细胞中BCR-ABL融合基因的抑制作用及其分子机制。通过体外细胞实验结合分子生物学技术,发现蝎毒多肽可显著下调BCR-ABLmRNA及蛋白表达,诱导细胞凋亡并抑制增殖,其作用可能与调控PI3K/AKT信号通路相关。实验采用威尼德电穿孔仪、紫外交联仪等设备,为靶向治疗CML提供潜在策略。引言慢性粒细胞白血病(CML)是一种由BCR-ABL融合基因驱动的血液系统恶性肿瘤,其异常激活的酪氨酸激酶活性导致细胞增殖失控。目前,酪氨酸激酶抑制剂(T...
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摘要基因表达谱芯片技术,系统分析β干扰素转染人源细胞后反式调节基因的表达变化。通过威尼德电穿孔仪实现高效转染,结合威尼德分子杂交仪完成基因表达谱检测,筛选出差异表达基因并进行功能富集分析。实验验证表明,β干扰素显著调控多个参与免疫应答和信号转导的基因,为阐明其抗病毒及免疫调节机制提供了新依据。引言β干扰素(IFN-β)是一类具有抗病毒、抗增殖及免疫调节功能的多效细胞因子,其生物学效应主要通过激活JAK-STAT信号通路并诱导下游基因表达实现。然而,β干扰素对细胞基因组的全局性...
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摘要人巨细胞病毒(HCMV)基因重组质粒,利用威尼德电穿孔仪转染人成纤维细胞,结合荧光定量PCR、Westernblot及共聚焦显微技术,系统分析HCMV在基因编辑细胞中的复制动态。结果显示,HCMVIE2蛋白显著调控病毒DNA合成,且宿主细胞NF-κB信号通路参与复制调控。HCMV致病机制提供了新视角。引言人巨细胞病毒(HCMV)是一种广泛传播的β-疱疹病毒,可引发免疫功能低下患者严重并发症。其复制机制复杂,涉及病毒基因与宿主因子的多重互作。近年研究表明,病毒立即早期蛋白(...
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摘要白蛋白微泡的理化特性,系统探讨其介导心肌细胞报告基因转染的机制。实验利用威尼德电穿孔仪制备微泡载体,结合某试剂构建荧光素酶报告质粒,分析不同参数对转染效率的影响。结果表明,微泡粒径与声场强度的协同作用显著提升基因递送效率,为心肌细胞靶向治疗提供了新思路。引言心肌细胞再生能力有限,基因治疗为其功能修复提供了潜在策略。然而,传统病毒载体存在免疫原性风险,非病毒递送系统则面临转染效率低的技术瓶颈。白蛋白微泡因生物相容性优异且可响应超声空化效应释放基因,逐渐成为研究热点。既往研究...
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摘要基因表达谱芯片技术筛选XTP4基因转染后细胞的差异表达基因。采用威尼德电穿孔仪构建稳定转染细胞模型,提取RNA后利用威尼德紫外交联仪和分子杂交仪进行芯片杂交及信号检测。共鉴定出327个显著差异表达基因,涉及代谢调控和细胞周期通路。实验结果为解析XTP4的分子机制提供了新依据。引言XTP4基因作为一类新型调控因子,在细胞增殖与凋亡中发挥关键作用,但其具体分子机制尚未明确。基因表达谱芯片技术因其高通量、高灵敏度的优势,已成为筛选差异表达基因的重要工具。目前,针对XTP4的转染...
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摘要PS1TP1基因转染后细胞中差异表达基因的调控网络。通过威尼德电穿孔仪实现高效基因转染,结合高精度分子杂交仪完成基因表达谱检测,筛选出132个显著差异表达基因(|log2FC|1,p引言PS1TP1基因作为新发现的肿瘤调控因子,其功能机制尚不明确。传统研究依赖单一基因检测或低通量技术,难以全面解析其下游网络,且存在灵敏度低、重复性差等技术瓶颈。此外,现有转染技术常因细胞损伤导致数据偏差,而杂交分析中非特异性结合问题亦影响结果可靠性。针对上述痛点,本研究提出两大突破方向:1...