摘要‌通过系统优化威尼德电穿孔仪参数，建立原代软骨细胞siRNA递送新策略。采用梯度脉冲电压（200-400V）联合间歇式电场刺激，转染效率提升至82.3%±3.1（vs传统方法38.5%±5.2），细胞存活率维持89.6%±2.8。荧光示踪与qPCR验证COL2A1基因沉默效率达76.8%，为软骨退行性疾病治疗提供高效递送方案。‌引言‌软骨细胞基因编辑技术长期受限于细胞外基质屏障与低转染效率。传统脂质体法在原代软骨细胞中仅实现本研究...

‌摘要‌优化体内电穿孔参数（电压200V，脉宽50ms，脉冲间隔500ms），结合靶向免疫细胞的DNA疫苗设计（某试剂），在BALB/c小鼠模型中实现抗原表达效率提升至85.3±5.2%，并显著增强特异性IgG抗体（4.1倍）和CD8+T细胞应答（3.8倍）。研究为DNA疫苗的临床转化提供了高效递送策略。‌引言‌DNA疫苗因其安全性及诱导全面免疫应答的优势成为研究热点，但体内递送效率低限制了其应用。传统肌肉注射法抗原表达不足，而电穿孔通过瞬时膜通透性增强可促进D...

‌摘要‌悬浮细胞电穿孔转染效率低的问题，通过优化电穿孔参数（电压、脉冲宽度、脉冲数）、引入细胞膜通透性增强剂（某试剂）及核定位信号（NLS）修饰质粒，显著提升JurkatT细胞的转染效率至72.6±4.1%，同时维持细胞存活率90%。研究为基因治疗及功能研究提供了高效、低损伤的转染方案。‌引言‌悬浮细胞（如JurkatT细胞、K562细胞）因缺乏贴壁结构，电穿孔转染效率普遍低于贴壁细胞。传统方法依赖高电压脉冲，易导致细胞膜不可逆损伤及DNA断裂。近年研究提出动态...

‌摘要‌慢病毒载体介导的基因整合技术，成功构建了基于雌激素响应元件（ERE）的稳转细胞株（ER-SC）。实验表明，ER-SC在17β-雌二醇（E2）刺激下荧光报告基因表达强度提升12.3倍，且稳定性维持超过20代。机制分析揭示ERα通过协同H3K4me3修饰增强ERE启动子活性，为激素依赖性疾病的体外模型开发提供新工具。‌引言‌雌激素受体（ER）信号通路的异常激活与乳腺癌、子宫内膜癌等疾病密切相关。传统瞬时转染模型存在重复性差、灵敏度低等问题，而稳转细胞株可通过基因组整合实现...

摘要溶胶-凝胶法结合静电吸附策略制备了聚赖氨酸修饰的硅纳米复合物（PLA-SiNPs），其粒径为150±20nm，表面电荷+25.3mV，可高效负载质粒DNA（包封率91.2±3.5%）。体外实验表明，PLA-SiNPs的转染效率达78.4±5.1%，较未修饰硅纳米颗粒提升2.8倍，且细胞毒性显著降低（存活率95%），为基因递送提供了新型高效载体。‌引言‌基因转染效率是限制基因治疗和功能研究的关键因素。传统非病毒载体（如脂质体、聚乙烯...

‌摘要‌阳离子脂质体/聚电解质双层转染粒子（DTP），通过优化表面电荷与粒径显著提升轮状病毒（RV）基因组递送效率。实验表明，DTP的感染性复活效率达82.3±4.1%，较传统单层脂质体提高2.3倍。机制分析表明，DTP通过增强细胞吸附、内体逃逸及核酸保护实现高效病毒复活，为RV体外研究及疫苗开发提供新策略。‌引言‌轮状病毒（Rotavirus,RV）是婴幼儿病毒性胃肠炎的主要病原体，其体外感染性复活效率是疫苗研发和致病机制研究的关键瓶颈。传统递送系统（如单层脂...

摘要核酸分子杂交技术在病毒感染诊断中的应用。通过优化实验条件，建立了基于核酸分子杂交技术的病毒检测方法。实验结果表明，该方法具有较高的灵敏度和特异性，能够有效检测多种病毒核酸。研究还探讨了该技术在临床样本检测中的应用价值，为病毒感染诊断提供了新的技术手段。引言病毒感染是全球公共卫生面临的重大挑战之一，快速、准确的病毒检测方法对于疾病诊断和防控至关重要。核酸分子杂交技术作为一种重要的分子生物学方法，在病毒检测领域展现出巨大潜力。该技术基于核酸碱基互补配对原理，通过特异性探针与目...

摘要分子杂交技术，对17株不同毒力的钩端螺旋体基因组DNA进行同源性分析，旨在揭示其毒力差异的分子基础。通过提取基因组DNA、标记探针、杂交及信号检测等步骤，发现高毒力株与低毒力株在基因组结构上存在显著差异。研究结果为钩端螺旋体毒力机制研究提供了重要依据引言钩端螺旋体（Leptospira）是一种重要的人兽共患病原体，其毒力差异与基因组结构密切相关。分子杂交技术作为一种经典的基因组分析方法，能够高效检测DNA序列的同源性，广泛应用于病原微生物的毒力基因研究。近年来，随着钩端螺...