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摘要:本研究采用猪尾小组织块贴壁培养法成功分离培养出原代猪成纤维细胞,并进行了不同时期的绿色荧光蛋白(GFP)阳性质粒转染效率的研究。实验结果显示,原代细胞具有较高的转染效率,且传代和复苏细胞亦能成功转染。该研究为猪成纤维细胞的基因编辑和体细胞克隆提供了有价值的参考。引言:成纤维细胞作为重要的供体细胞之一,在医学、动物科学及基础研究中具有广泛的应用价值。在医学上,成纤维细胞可用于疾病诊断、人工皮肤制备、组织创伤修复及组织器官培养等方面。在动物科学领域,成纤维细胞则可用于体细胞...
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摘要本研究旨在探讨外源性端粒酶基因(hTERT)转染对猪气管上皮细胞(STECs)增殖特性的影响。通过脂质体法将重组质粒pCI-neo-hTERT导入STECs,转染后的细胞表现出增高的增殖活性,并保持基本的细胞生物学特征,为建立稳定传代的细胞系提供了可能。引言哺乳动物的气管黏膜上皮细胞(Tracheaepitheliumcells,TECs)不仅是多种病原体的靶细胞,也是阻挡病原入侵的重要屏障。猪气管上皮细胞(Swinetracheaepitheliumcells,STEC...
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摘要:本文旨在探索优化原代大鼠海马神经元转染方法,以提高树突棘形态学观察的效果。通过比较Lipofectamine2000和慢病毒转染方法,发现Lipofectamine2000在转染效率和荧光表达上更具优势。在培养12天的神经元中转染,20天时树突棘形态学观察效果佳。本研究为神经退行性疾病的突触可塑性机制研究提供了重要手段。引言:树突棘是脑内兴奋性连接的主要位点,在突触形成及其功能上发挥着重要作用。树突棘在数量和形态方面的改变会直接影响突触的功能,进而影响脑功能的改变。因此...
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摘要:本研究旨在构建重组真核表达载体pIRESneo2/mIL-2,并在哺乳类工程细胞C2C12中实现持续稳定表达小鼠白介素2(mIL-2)。通过脂质体转染法导入重组载体,经Westernblots验证成功表达mIL-2。本研究为mIL-2的进一步研究和应用提供了重要基础,具有重要的学术和应用价值。引言:白介素2(IL-2)是一种重要的细胞因子,属于白介素家族,对免疫系统具有显著的调节作用。IL-2能够刺激和增强T细胞的增殖和活化,促进免疫细胞亚群的分化和功能调节,因此在免疫...
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摘要:本研究旨在通过基因打靶技术,构建牛朊蛋白基因prnp的敲除载体,并转染牛胎儿成纤维细胞,实现prnp基因的高效敲除。利用正负筛选策略富集中靶细胞,最终获得了9个阳性细胞克隆。本研究为生产抗疯牛病的转基因牛提供了理论基础和技术支持。引言:朊蛋白(Prionprotein)是动物传染性海绵状脑病的致病蛋白,由prnp基因编码的一种糖蛋白。在牛中,这种病症被称为疯牛病(BSE),是一种严重危害人类健康和世界经济发展的传染性疾病。疯牛病的病原体是PrPsc,一种内源性膜锚定蛋白...
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摘要:本文探讨了聚凝胺(Polybrene)在提升慢病毒转染树突状细胞效率中的作用。通过详细的实验设计和实施,发现聚凝胺能显著增强病毒颗粒与树突状细胞的结合,从而提高转染效率。本研究为基因功能研究和基因治疗提供了新的策略,具有广阔的应用前景。引言:基因转染技术在生物医学研究中占据重要地位,尤其在基因功能研究和基因治疗领域。慢病毒载体因其高效、稳定的特点而被广泛应用于细胞转染。然而,树突状细胞(DendriticCells,DCs)作为重要的免疫细胞,其转染效率一直较低,限制了...
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引言内耳疾病,如感音神经性耳聋和梅尼埃病等,严重影响患者的生活质量。基因治疗作为一种新兴的治疗手段,在内耳疾病的治疗中展现出巨大潜力。然而,内耳结构的复杂性和对损伤的高度敏感性,使得基因递送成为一大挑战。慢病毒载体因其高效、持久的基因表达能力,成为内耳基因治疗研究的工具。小鼠耳蜗鼓室内注射是常用的内耳基因递送方法之一,但转染效率往往受到多种因素的影响。因此,优化小鼠耳蜗鼓室内慢病毒转染技术,提高转染效率和安全性,对于推动内耳基因治疗的发展具有重要意义。构建慢病毒转染内耳疾病的...
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引言:SARS(严重急性呼吸综合征)冠状病毒是一种高传染性的病原体,自2002年底爆发以来,对全球公共卫生构成了严重威胁。SARS-CoV的S蛋白不仅是病毒的主要结构蛋白,还在病毒与宿主细胞表面受体结合及介导膜融合进入细胞的过程中起关键性作用。因此,S蛋白成为SARS疫苗研究的主要靶点。裂殖酵母作为一种非常有前景的外源基因表达系统,表达的外源蛋白更接近其天然特性,是分子生物学研究中的重要工具。本研究旨在构建SARS-CoVS蛋白在裂殖酵母中的表达体系,为进一步研究新一代SAR...