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引言外源基因导入哺乳动物细胞是基因功能研究、基因治疗及细胞工程等领域的关键技术。高效、安全的基因转移方法对于实现外源基因在细胞内的稳定表达至关重要。传统方法如脂质体介导转染、病毒载体转导等虽各有优势,但存在细胞毒性大、操作复杂或安全性隐患等问题。电穿孔法作为一种物理转染技术,通过短暂施加高压电场使细胞膜形成微小孔洞,允许外源DNA进入细胞,具有操作简便、适用范围广及可大规模应用等优点。然而,电穿孔过程对细胞损伤较大,转化效率与细胞存活率往往难以平衡,限制了其广泛应用。构建高效...
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摘要:本文详细阐述了大豆矮杆导入系的外源片段剖析及基因定位研究,通过绘制图示基因型方法分析了含有矮杆基因S的片段导入系,共检测到100个导入片段,确定了多个与矮杆基因密切相关的位点。本研究为进一步研究大豆矮杆基因提供了重要基础,对大豆育种具有重要意义。引言:大豆(Glycinemax)作为重要的粮油兼用作物,在全球范围内广泛种植。大豆种子富含蛋白质和植物油,对人类饮食和健康具有重要作用。然而,传统大豆品种生长周期长、植株高大,给管理和收割带来不便。因此,培育矮杆大豆品种成为大...
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摘要本研究旨在探索电穿孔介导睫状神经营养因子(CNTF)基因转染在延缓失神经骨骼肌方面的疗效。通过构建CNTF基因转化体系,采用某品牌电穿孔仪对SD大鼠进行基因转染,观察其对骨骼肌的抑制作用。实验结果表明,电穿孔介导CNTF基因转染可显著延缓失神经骨骼肌进程,为神经肌肉疾病的治疗提供新的策略。引言神经营养因子(NTFs)作为一类具有促进和维持神经细胞生长、存活和分化的特异性蛋白质,为神经修复治疗带来了新的希望。睫状神经营养因子(CNTF)是NTFs中的重要成员,具有广泛的生理...
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摘要:本研究旨在联合运用阳离子多聚物PEI和方波电穿孔两种不同机制的转染手段,以期克服精子难转染的问题。通过形成稳定复合物、吸附细胞表面、胞吞作用进入细胞、内涵体逃逸与DNA释放等步骤,实现了对小鼠精子的高效核内转染,为精子载体法在大动物中的应用提供了成功的模式。引言精子载体法是一种以精子为载体,利用精子与卵子结合的过程将外源基因带入受精卵中形成转基因动物的方法。该法无需专门的大型设备和技术,简单便捷,应用广泛,尤其对于猪、牛、羊等大动物更有方法学上的优势,科学界一直寄厚望于...
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摘要:本研究通过电穿孔技术将人端粒酶逆转录酶(hTERT)转染至许旺细胞,旨在提升其增殖能力和抗衰老性能,进而为神经损伤修复提供新型细胞资源。实验结果显示,hTERT转染显著增强了许旺细胞的增殖能力和端粒酶活性,优化了细胞形态。本研究为神经损伤修复策略提供了理论基础和技术支持。引言:神经损伤疾病严重影响患者的生活质量,寻找有效的修复策略显得尤为关键。许旺细胞(又称雪旺细胞)作为周围神经损伤修复中的重要细胞,具有分泌多种神经营养因子、引导轴突生长及髓鞘化的功能。然而,许旺细胞在...
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摘要:本研究旨在建立一种高效的人外周血单核细胞分离及电穿孔转染方法。通过基于HISTOPAQUE的密度梯度离心及抗体标记纯化方法分离单核细胞,并使用某品牌电穿孔仪进行转染。结果显示,单核细胞纯度高达89.95%,转染效率为60%~70%。该方法为后续单核细胞功能研究提供了可靠的技术支持。引言人外周血单核细胞作为免疫系统的重要组成部分,在感染、炎症及免疫反应中发挥关键作用。为了深入研究单核细胞的功能及其在各种疾病中的作用机制,首先需要建立高效的单核细胞分离和转染方法。单核细胞的...
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摘要:本研究旨在建立一种高效电穿孔介导siRNA转染原代软骨细胞的方法,以实现基因沉默效果并维持较高的细胞存活率。通过优化电穿孔参数和使用高效电转缓冲液,成功实现了siRNA的高效转染,为基因功能研究和疾病机制探讨提供了有力工具。引言在生命科学研究领域,RNA干扰(RNAi)技术已成为研究基因功能和疾病机制的重要工具。小干扰RNA(siRNA)作为RNAi的关键效应分子,能够特异性地沉默目标基因的表达。然而,由于细胞类型的多样性和siRNA的自身特性,siRNA的转染过程面临...
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摘要:本文详细探讨了裸质粒转染细胞的可行性,通过构建真核载体PCDNA3.1(+)-EGFP与pEGFP-C3的绿色荧光蛋白表达系统,验证了裸质粒直接转染细胞的效率及其影响因素。实验结果表明,真核载体可直接通过细胞膜进入细胞并表达绿色荧光,但其转染效率与质粒的结构和浓度密切相关。本研究为基因治疗及基因功能研究提供了新的思路和方法。引言基因转染是现代分子生物学研究中的一项基础且关键的技术,广泛应用于基因表达研究、基因功能分析、蛋白质生产以及疫苗开发等领域。传统的基因转染方法多采...