威尼德分子杂交仪：核酸分子杂交中杂交信号低于预期的影响因素

1 放射自显影期间膜对胶片的曝光时间不足。

2 核酸转移或结合在尼龙膜上的效率低

3 目标序列以非常低的拷贝数存在。增加加载到凝胶上的样品量。

4 没有足够数量的探针序列，增加探针的浓度或加入10%硫酸葡聚糖，这样减少了溶剂体积，可以到到相同的效果。

5 没有探针同源性。

6 双链DNA探针未变性，或者，探针检测仪性能下降。在使用RNA探针时发生可能更大。

7 探针的比活性太低。考虑诸如标记反应中的探针浓度、放射性标记的三磷酸盐的半衰期等因素。

8 杂交和/或洗涤过程中试验方法不佳：

1）增加盐的浓度。

2）降低温度。

3）降低SDS的浓度。

4）减少清洗时间。

5）杂交时间太短。