摘要：本研究旨在构建人P2X7基因的真核表达载体，并通过转染获得稳定表达P2X7分子的HEK293细胞株。以人脑组织P2X7cDNA为模板扩增出P2X7基因，插入到真核表达载体pEGFP-N1中，构建重组质粒pEGFP-N1/P2X7。通过G418辅助荧光筛选，成功建立了稳定表达P2X7-EGFP的HEK293细胞系。该细胞系的建立为进一步研究P2X7离子通道的结构和功能奠定了坚实基础。引言P2X7受体是嘌呤能受体家族中的一种重要成员，属于配体门控离子通道受体。P2X7受体被...

摘要本文旨在探讨电转法（电穿孔法）在修饰的信使核糖核酸（modRNA）细胞转染中的应用效果及相关特性。通过优化电转参数，实现了在HEK293和HeLa细胞系中高效的modRNA转染，并评估了转染效率、细胞活力及基因表达水平。本研究为modRNA在基因功能研究、细胞治疗等领域的进一步应用提供了实验基础。引言在现代分子生物学与细胞生物学研究领域，将外源核酸分子高效地导入细胞内是一项极为关键的技术手段。其中，modRNA修饰技术的出现为基因表达调控、疾病治疗等多方面研究开辟了新的途...

摘要为了建立稳定表达谷胱甘肽过氧化物酶6（Glutathioneperoxidase6,GPx6）的真核表达细胞系，本研究对GPx6进行基因克隆，构建了慢病毒表达载体，并成功建立了表达猪源GPx6的CHO-K1细胞系。该研究成果为GPx6在猪繁殖力提高和精液稀释液添加剂的应用提供了新思路。引言谷胱甘肽过氧化物酶6（GPx6）作为抗氧化酶家族的重要成员，在生物体内具有抗氧化和细胞保护的作用。近年来，GPx6在生殖健康领域的研究逐渐增多，尤其是在猪繁殖力提高方面展现出潜在的应用价...

摘要：本研究旨在探讨肝细胞生长因子（hepatocytegrowthfactor,HGF）基因通过肾脏电转染方法对大鼠肾缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusioninjury,IRI）的保护作用。通过构建hHGF基因表达载体，并利用威尼德电转染系统将其导入大鼠肾脏，观察其对肾功能、组织学改变及细胞凋亡的影响。结果表明，hHGF基因电转染能有效减轻肾缺血再灌注损伤，为肾保护提供新的策略。引言肾缺血再灌注损伤是临床肾脏移植、肾脏部分切除术及主动脉瘤手术等过程中的常见...

摘要本研究旨在探讨山羊精子电穿孔转染外源DNA的最适条件，并评估其对精子活力和转染效率的影响。通过优化电场强度、电击时间和电击次数等参数，确定了山羊精子电穿孔转染外源DNA的最佳条件。实验结果显示，在400V、200μs条件下电击一次，精子活力和转染效率显著提高，为生产转基因山羊奠定了基础。引言基因转移技术是现代生物技术的重要组成部分，尤其在动物转基因领域具有广泛应用。精子介导的基因转移因其操作简便、成本低廉而受到广泛关注。其中，电穿孔法作为一种高效的物理方法，能够通过产生暂...

摘要：本研究成功构建了基于重组酶的大豆基因定点编辑系统，通过结合CRISPR/Cas9系统和重组酶技术，显著提高了基因编辑的效率和精准度。实验结果表明，该系统能有效实现大豆基因的定点突变，并减少了脱靶效应的发生。该系统为大豆遗传改良和分子育种提供了新的技术手段，具有重要的理论和实践意义。引言传统的育种方法存在周期长、效率低的问题，且难以实现对特定基因的精准编辑。近年来，基因编辑技术，特别是CRISPR/Cas9系统的出现，为大豆遗传改良提供了新的途径。然而，CRISPR/Ca...

摘要：本研究旨在探讨结核DNA疫苗通过肌肉注射联合电转染方法在增强免疫反应中的效果。我们构建了结核DNA疫苗质粒，并通过威尼德电转染设备对小鼠进行免疫接种。结果显示，该方法显著提高了抗体滴度和T细胞反应。本研究为结核DNA疫苗的高效递送提供了新的策略，具有广阔的应用前景。引言结核病（TB）是一种由结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis，Mtb）引起的慢性传染病，是全球公共卫生的重要威胁。尽管现有疫苗卡介苗（BCG）在一定程度上能预防儿童重症结核病，但...

摘要本文详细探讨了使用电穿孔法将重组杆状病毒基因组转染至昆虫细胞的过程。研究通过优化转染条件，比较了电穿孔法与脂质体转染法的效率，并评估了子代病毒的感染能力。结果显示，电穿孔法具有操作简便、周期短、成本低等优点，为重组杆状病毒在昆虫细胞中的高效表达提供了新的方法，具有广阔的应用前景。引言杆状病毒表达系统是一种真核表达系统，具有高效表达目的蛋白的能力，并能对蛋白进行修饰和加工，使其具备一定的生物学和免疫学活性。该系统在基因工程产品的生产中得到了广泛应用，尤其在昆虫细胞中，重组杆...