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2-24
摘要在肝细胞中同时表达加强型黄色荧光蛋白(EYFP)与血管内皮生长因子(VEGF)双基因,以探讨其在肝细胞功能研究中的应用。实验采用某品牌电穿孔仪进行转染,并通过荧光显微镜观察EYFP表达,同时利用ELISA检测VEGF蛋白水平。结果表明,双基因共转染效率高,为肝细胞基因功能研究提供了可靠工具。引言肝细胞作为肝脏的主要功能细胞,在代谢、解毒及合成等多种生理过程中发挥重要作用。近年来,基因转染技术已成为研究肝细胞功能的重要手段。加强型黄色荧光蛋白(EYFP)作为一种常用的报告基...
2-24
摘要本研究旨在优化电穿孔法转染人原代成纤维细胞的条件,以提高转染效率和细胞存活率。通过调整电压、脉冲时间和细胞密度等参数,我们确定了最佳转染条件。实验结果表明,在特定条件下,转染效率显著提高,同时细胞存活率保持在较高水平。本研究为电穿孔法在基因功能研究和基因治疗中的应用提供了重要参考。引言人原代成纤维细胞在组织工程、再生医学和基因功能研究中具有重要应用。然而,由于其难以转染的特性,如何高效地将外源基因导入这些细胞成为研究中的一大挑战。电穿孔法作为一种非病毒转染方法,因其高效性...
2-22
摘要开发聚乙亚胺/化学siRNA纳米递送系统,联合威尼德电穿孔仪优化转染参数,突破成骨细胞递送屏障。纳米颗粒粒径110.5±6.3nm(PDI0.15),转染效率达91.2%±2.8(vs脂质体法29.5%±4.1),细胞存活率94.7%±2.5。qPCR显示RUNX2mRNA表达降低76.4%(p引言成骨细胞因致密矿化基质与低内吞活性,导致siRNA递送效率长期低于30%(Xuetal.,2024)。化学合成s...
2-22
摘要构建阳离子聚合物/化学siRNA纳米复合物,结合威尼德电穿孔仪优化递送程序,实现肝癌原代细胞高效转染。纳米颗粒粒径85.3±4.2nm(PDI0.18),转染效率达89.7%±2.4(vs脂质体法32.1%±5.6),细胞存活率93.5%±3.1。qPCR显示VEGFAmRNA表达降低72.8%(p引言肝癌原代细胞因高异质性、低分裂活性及致密胞外基质,导致传统siRNA递送效率不足20%(Zhouetal.,2...
2-22
摘要开发时空耦合转染策略,显著提升胚胎海马神经元基因编辑效率。采用威尼德电穿孔仪递送CRISPR/Cas9质粒(脉冲参数:120V/15ms),联合脂质体/sgRNA复合物(包封率95.8%),转染效率达96.4%±1.7(vs单一方法引言胚胎海马神经元基因编辑受限于细胞脆弱性与转染效率-存活率矛盾。传统病毒载体(如AAV9)虽可实现80%转染率,但受限于载体容量(实验通过威尼德分子杂交仪构建脂质体/sgRNA纳米颗粒(粒径45.3±3.8...
2-22
摘要慢病毒载体与阳离子脂质体协同递送体系,显著提升原代软骨细胞转染效率。采用威尼德紫外交联仪构建LV-shCOL2A1慢病毒(滴度3.2×10⁸TU/mL),联合脂质体/siRNA复合物(包封率92.4%),转染效率达94.7%±2.1(vs单一方法引言原代软骨细胞基因调控受限于其致密细胞外基质与低分裂活性。传统慢病毒转染虽可实现稳定表达,但病毒滴度需求高(10⁹TU/mL)且易触发先天免疫应答(Wangetal.,2023);脂质体法虽操作简便,但在原代...
2-22
摘要通过系统优化威尼德电穿孔仪参数,建立原代软骨细胞siRNA递送新策略。采用梯度脉冲电压(200-400V)联合间歇式电场刺激,转染效率提升至82.3%±3.1(vs传统方法38.5%±5.2),细胞存活率维持89.6%±2.8。荧光示踪与qPCR验证COL2A1基因沉默效率达76.8%,为软骨退行性疾病治疗提供高效递送方案。引言软骨细胞基因编辑技术长期受限于细胞外基质屏障与低转染效率。传统脂质体法在原代软骨细胞中仅实现本研究...
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摘要优化体内电穿孔参数(电压200V,脉宽50ms,脉冲间隔500ms),结合靶向免疫细胞的DNA疫苗设计(某试剂),在BALB/c小鼠模型中实现抗原表达效率提升至85.3±5.2%,并显著增强特异性IgG抗体(4.1倍)和CD8+T细胞应答(3.8倍)。研究为DNA疫苗的临床转化提供了高效递送策略。引言DNA疫苗因其安全性及诱导全面免疫应答的优势成为研究热点,但体内递送效率低限制了其应用。传统肌肉注射法抗原表达不足,而电穿孔通过瞬时膜通透性增强可促进D...